Számos módja van a baktériumok növekedésének mérésére, és az egyik módszer bonyolultabb, mint a másik. Bár néha figyelmen kívül kell hagyni a mérés következetességét, elegendő a legegyszerűbb módszer a baktériumok szaporodásának pontos mérésére, így gyakran használják. A leggyakrabban használt módszerek a baktériumok megfigyelése és számlálása, a száraz vagy nedves tömeg mérése, valamint a zavarosság/zavarosság mérése. Az iskola laboratóriumának rendelkeznie kell a kísérletek legalább egyikének elvégzéséhez szükséges eszközökkel és berendezésekkel.
Lépés
1. módszer a 3 -ból: Élő baktériumok megfigyelése
1. lépés Készítse elő az összetevőket
Sok speciális eszközt kell előkészíteni, és előfordulhat, hogy nem állnak rendelkezésre biológiai laboratóriumban. A kísérlet végrehajtása előtt készítse elő az összes felszerelést és tartályt, hogy ne legyen gond a folyamat során. Azonnal fel kell ismernie minden felhasznált összetevőt, valamint a kísérlet alapvető feltételeit.
- Készítse elő a számláló kamrát. Beépített kamrával, mikroszkópüveggel és mikroszkóppal rendelkezik, így könnyen beállítható és használható. Laboratóriumi vagy iskolai áruházban vásárolhat. Ennek az eszköznek utasításokat kell tartalmaznia, amelyek végigvezetik az egész folyamaton.
- Készítsen elő öntőpoharat vagy kenőcsészét. Mindkét tartály lehetővé teszi a benne lévő baktériumok megfigyelését.
- A kultúra olyan kifejezés, amelyet az élőlények kísérletben történő növekedésének leírására használnak.
- A húsleves folyékony közeg, amelyben a tenyészet nő.
2. lépés Használja az öntőlemez vagy szórólap módszerét
A baktériumokat közvetlenül az edényre is helyezheti, hogy mikroszkóp segítségével megtekinthesse őket. Öntsük a tenyészetet egy csészealjra, és tegyük a mikroszkóp alá. Figyelje a baktériumsejtek számát.
3. lépés. Győződjön meg arról, hogy a koncentráció adagja megfelelő
Ha túl sok van, a baktériumok egymásra halmozódnak, és tévesen számolhat. Hígítsa fel a tenyészetet további húsleves keverésével. Ha túl kevés van, a számítás eredményei nem lesznek pontosak. Szűrje le a levest szűrőrendszerrel.
4. lépés Számolja meg a baktériumokat
Az utolsó lépés a baktériumok egyenként történő számlálása. Nézzen át a nagyítólencsén a számláló kamrában, és írja le a baktériumok számát. Hasonlítsa össze az eredményeket más tesztek eredményeivel.
2. módszer a 3 -ból: Száraz és nedves tömeg mérése
1. lépés. Győződjön meg arról, hogy megfelelő felszereléssel rendelkezik
Ez a módszer drága berendezéseket és sok időt igényel. Ha a laboratórium nem rendelkezik a szükséges felszereléssel, akkor érdemes másik módszert használni. Ha azonban laboratóriuma kellően felszerelt, javasoljuk ezt a módszert, mivel következetesebb eredményeket biztosít. Ebben a módszerben szüksége lesz:
- Hidraulikus gravitációs konvekciós sütő
- Mérőtartály alumíniumból
- Lombikok (laboratóriumi palackok)
- Centrifugális gép (centrifuga) vagy laboratóriumi szűrőrendszer
2. lépés. Győződjön meg arról, hogy a tenyészet a lombikban van
Adja hozzá a tenyészetet a tökhöz. Ebben a szakaszban a kultúrának húslevesnek kell lennie, bár később újra elválasztják.
3. lépés Szárítsa meg az alumínium mérőedényt a laboratóriumi sütőben
Ehelyett használhat 47 mm átmérőjű és 0,45 µm pórusméretű cellulóz -acetát szűrőmembránt. Bármilyen mérőedényt használ, mérlegelje, mivel később le kell vonni a baktériumsejtek mérésekor.
4. lépés Keverjük a tenyészetet a lombikba, amíg egyenletesen el nem keveredik
A sejt természetes módon elsüllyed a gravitáció hatására, és keverni kell, hogy egyenletesen eloszlassa a lombikban. Így több mintát kaphat.
5. lépés: Centrifuga segítségével válassza le a baktériumsejteket a húslevestől
Ez az eszköz forgatja a lombikot és gyorsan kiegyensúlyozódik úgy, hogy leereszti a levest, és a tenyészetet a lombikban hagyja.
6. lépés Kaparja le a pasztát a sütőtökről, és tegye egy mérőedénybe
Dobja ki a húslevest, mert már nincs rá szüksége. Azonban még ne szabaduljon meg a töktől, mert továbbra is használni fogják.
7. lépés Öblítse le a centrifugális gépet, és öntse az öblítővizet a tartályba
A lombikban lévő öblítővizet cseppentsük a baktériumsejtekre a nedves tömeg eléréséhez.
8. lépés. Keresse meg a száraz súlyt
A száraz tömeg méréséhez helyezze a tartályt a sütőbe, és szárítsa 100 ° C-on 6-24 órán keresztül a sütő és/vagy a használt mérőedény utasításai szerint. Ügyeljen arra, hogy a hőmérséklet ne legyen túl magas, hogy a baktériumok ne égjenek. Ha elkészült, mérje le a baktériumokat, és ne felejtse el csökkenteni az eredményt a mérőedény súlyával.
3. módszer 3 -ból: A zavarosság mérése
1. lépés. Készítse elő a szükséges felszerelést
Szükséged lesz fényforrásra és spektrofotométerre. Mindkettő beszerezhető a laboratóriumi áruházakban. A spektrofotométernek rendelkeznie kell olyan utasításokkal, amelyek elvezetik Önt a készülék használatához az Ön modellje szerint. A spektrofotométer ára meglehetősen megfizethető és könnyen használható, így a baktériumok növekedésének egyik leggyakrabban használt módszerévé válhat.
2. lépés Világítsa meg a mintát
Layman kifejezése szerint a zavarosság a minta zavarossági szintje. Meg kell kapnia a zavarosság mérési számát, amelyet NTU -ban (Nephelometric Turbidity Unit) kell mérni. Ezt az eszközt kalibrálni kell, mielőtt pontosan meg tudja mérni a mintát.
3. lépés. Jegyezze fel az eredményeket
A zavarosságot befolyásolja a mintában lévő baktériumok száma. A spektrofotométer a transzmisszió százalékát is megmondja (%T). Ez a szám növekedni fog, ha a zavarosság csökken. Hasonlítsa össze az eredményeket a baktériumok szaporodását mérő más tesztek eredményeivel.
Figyelem
- Mivel bakteriális kolóniával van dolga, tegyen óvintézkedéseket védőfelszerelés, például védőszemüveg és kesztyű viselése mellett. Maszk viselése is jó ötlet, különösen akkor, ha nem ismeri a vizsgált baktériumok típusát.
- Tegyen óvintézkedéseket, mielőtt bármilyen típusú, még az ártalmatlan baktériumot is kezelne. Mielőtt elkezdené, győződjön meg arról, hogy a test összes nyitott sebét teljesen eltakarja.
