A pipetták laboratóriumi berendezések, amelyeket nagyon kis mennyiségű folyadék mérésére és átvitelére használnak. A pipetta mérésének pontossága nagyon fontos, mert a pipetta által leejtett térfogat különbségei befolyásolhatják a kísérleti eredményeket. A pontosság biztosítása érdekében fontos néhány havonta ellenőrizni a pipetta kalibrálását. A kalibrálási folyamat hasznos annak ellenőrzésére, hogy a berendezés megfelelő mennyiségben csepegtet -e folyadékot, hogy szükség esetén javításokat lehessen végezni.
Lépés
Rész 1 /2: A kalibrálás ellenőrzése
1. lépés Gyűjtse össze a szükséges anyagokat
A pipetta kalibrálásának ellenőrzéséhez pipetta, pipettahegyek, desztillált víz, főzőpohár, hőmérő, mérleg és mérőpohár szükséges. A mérlegnek mikrogramm skálán kell lennie a mikropipetta legfeljebb 1 literes kalibrálásához.
- Nem kell több, mint 5 ml víz. Töltse fel a főzőpoharat vízzel.
- Győződjön meg arról, hogy a pipetta hegye megfelelő és jól illeszkedik a pipettába.
2. lépés. Mérje meg a desztillált víz hőmérsékletét
Tegye a hőmérőt a vízbe, és hagyja ülni legalább egy percig. Ha a hőmérő piros vonala még mindig mozog, várjon még egy percet. Egy perc múlva jegyezze fel a hőmérsékletet. Vegye elő a hőmérőt, és szárítsa meg, ha elkészült.
Fontos tudni a víz hőmérsékletét, mert a kalibráció ellenőrzésére elvégzett számításokhoz fogják használni
3. lépés Helyezze a mérőpoharat a mérlegre, és nullázza a mérleget
Ideális esetben a használt mérlegnek van egy ajtaja és egy szigetelt tere. Helyezze a mérőpoharat a mérlegkamrába, és csukja be az ajtót. Ha a mérleg nem rendelkezik fülkével és ajtóval, tegyen egy mérőpoharat a mérlegre. Nyomja meg a „Zero” vagy „Tara” gombot, és várja meg, amíg a skála nullát mutat.
A mérleg nullázása csökkenti a műanyag pohár súlyát, és lehetővé teszi, hogy csak a csészébe helyezett anyag tömegét mérje
4. lépés: Készítse elő a pipettát a kalibráláshoz
Indítás előtt törölje le a pipettát etanollal, és győződjön meg arról, hogy semmi nem tömíti el a pipetta hegyét. Rögzítse a megfelelő pipettahegyet a pipettahegyhez, és határozza meg a vizsgálandó térfogatot.
A kalibráláshoz próbálja ki a pipetta eltávolítható legkisebb és legnagyobb térfogatát
5. lépés Mossa meg a pipetta hegyét a kalibrálás előtt
Nyomja meg a gombot az első határig, és mártsa a pipetta hegyét a desztillált vízbe körülbelül 2 mm mélységig. Engedje el a gombot, hogy felszívja a folyadék egy részét, majd engedje el újra a folyadékot a gomb megnyomásával. Ismételje meg ezt a lépést háromszor, hogy használat előtt mossa le a csepegtetőhegyeket.
Nyomja meg a gombot a második határig, hogy eltávolítsa a maradék folyadékot a pipetta hegyéről, majd vegye ki a pipettát a vízből
6. lépés. Szívja fel a kalibrációs térfogatot
Ha a pipetta hegye a desztillált vízen kívül van, nyomja meg a gombot az első határig. Merítse a pipettahegyet 2 mm mélyen a desztillált vízbe, és engedje el a gombot, hogy a folyadékot a pipettahegybe szívja. Várjon körülbelül 1 másodpercet, mielőtt eltávolítja a csepegtető hegyét a vízből.
Győződjön meg arról, hogy a pipetta hegye teljesen el van merülve az aspirációs folyamat során. A csepegtető hegyében nem lehetnek buborékok, vagy az eredmény rossz lehet
7. lépés: Öntse a folyadékot a mérleg edényébe
Helyezze a pipettahegyet a mérőpohár aljára, majd nyomja le a pipetta gombot az első határig. Lépjen egy másik pontra, egy kicsit távol a víztől, majd nyomja meg a gombot a második határig. Tartsa lenyomva a gombot, és emelje ki a pipettahegyet a mérőpohárból.
Tartsa a hegyét a pipettához, mivel más kalibrálási tesztekhez fogja használni
8. lépés. Jegyezze fel a mérlegen látható súlyt
Zárja be a mérlegfülke ajtaját, ha ajtómérleget használ. Várjon, amíg a számok nem változnak. Írd fel a füzetedbe.
Fontos, hogy várjon, amíg a skálán lévő számok nem változnak újra, mielőtt felírná őket. A jegyzetek elromlanak, ha nem vár
9. lépés Ismételje meg ezt a folyamatot, hogy legalább tízszer elvégezze a leolvasást
Nullázza le újra a mérleget, használat előtt mossa le a pipettahegyeket, szívja fel ugyanolyan mennyiségű folyadékot, távolítsa el a térfogatot, majd jegyezze fel a súlyt. Jegyezze fel a desztillált víz tömegét ugyanarra a térfogatra, majd az összes jegyzet átlagát.
Ezt a folyamatot megismételheti különböző köteteknél, ha minden kötetet többször tesztel
2/2. Rész: A kalibrálási eredmény kiszámítása
1. lépés. Határozza meg a kiszámított térfogat képletét
A pipetta által kibocsátott folyadék térfogatának kiszámítására szolgáló képlet: V = w * Z, w a víz tömege, Z a víz sűrűségén alapuló átváltási tényező, míg V a vízmennyiség eltávolították.
- A Z változó a víz sűrűségének kiszámításával kapható a kísérlet elején rögzített hőmérséklet felhasználásával.
- Például: Ha a víz hőmérséklete 23 ° C, a Z érték 1,0035 g/mg.
2. lépés. Számítsa ki a pipetta kalibrációinak átlagát
A pipetta által kibocsátott vízmennyiséget legalább tízszer megmérték. Ezen értékek átlagolásához adja hozzá az összeset, és ossza el tízzel. Ha a folyamatot többé -kevésbé elvégezte, akkor adja össze az összesített eredményt, majd ossza el a végrehajtott kísérletek számával.
- Például: A 10 µL pipettával végzett 10 kísérletből származó víz tömege a következő: 9, 89, 10, 01, 10, 02, 9, 99, 9, 95, 10, 04, 9, 96, 10, 01, 9, 99 és 9, 98.
- Az átlag: (9, 89 + 10, 01 + 10, 02 + 9, 99 + 9, 95+ 10, 04 + 9, 96 + 10, 01 + 9, 99 + 9, 98)/10 = 99, 84/10 = 9 984
3. lépés: Csatlakoztassa a változókat az egyenlethez és oldja meg
Miután meghatározta az egyes változók helyes számát, csatlakoztassa a képlethez, és fejezze be a kiszámított kötetet. Ennek az egyenletnek a megoldásához egyszerűen szorozza meg az összes kísérlet átlagos súlyát a Z értékkel.
Például: V = w * Z = 9 984 * 1,0035 = 10, 019
4. lépés. Számítsa ki a pipetta pontosságát
Használja az A = 100 x V egyenletetátl/V0 a pipetta pontosságának kiszámításához. A jelzi a pipetta pontosságát, Vátl a számított átlagos térfogat, és V0 a pipettán beállított érték. A pontossági értéknek 99-101%között kell lennie.
- Ha a pipetta megfelelően van kalibrálva, a számított értéknek nagyon közel kell lennie a pipettán beállított tényleges értékhez.
- Például: A = 100 x Vátl/V0 = 100 x 10, 019/10 = 100 x 1,0019 = 100,19%
- Ez a pipetta megfelelően van kalibrálva.
5. lépés Ha szükséges, küldje el a pipettát kalibráláshoz
Ha a pipettája nem felel meg a kalibrálási teszten, ne használja azt kísérletezéshez. A pipetták nagyon törékeny és drága laboratóriumi berendezések. Ön nem tudja kijavítani a kalibrálást, a pipettát be kell küldeni javításra. Alternatív megoldásként több cég is eljön a laboratóriumába, és a helyszínen kalibrálja a pipettát.
